品質の応用

Dec 05, 2023

Scientific Reports volume 13、記事番号: 8559 (2023) この記事を引用

181 アクセス

2 オルトメトリック

メトリクスの詳細

ここでは、点眼薬および人工房水中の眼局所麻酔薬ベノキシネート塩酸塩 (BEN-HCl) を測定するための高感度で選択的な分光蛍光分析法が開発されました。提案された方法は、室温でのフルオレスカミンと BEN-HCl の第一級アミノ基との相互作用に基づいています。反応生成物を 393 nm で励起した後、放出された相対蛍光強度 (RFI) を 483 nm で測定しました。重要な実験パラメータは、分析による設計による品質アプローチを採用することによって慎重に検査され、最適化されました。この方法では、2 レベルの完全実施要因計画 (24 FFD) を使用して、反応生成物の最適な RFI を取得しました。検量線は、BEN-HCl 0.10 ～ 1.0 μg/mL の範囲で直線的で、感度は 0.015 μg/mL まででした。このメソッドは BEN-HCl 点眼薬の分析に適用され、高い回収率 (98.74 ～ 101.37%) と低い SD 値 (≤ 1.11) で人工房水中の添加レベルを評価することもできました。提案された方法の環境プロファイルを調査するために、分析エコスケール評価 (ESA) と GAPI を利用して環境評価が実行されました。開発されたメソッドは、感度が高く、手頃な価格で、環境的に持続可能なものであることに加えて、非常に高い ESA 評価スコアを獲得しました。提案された方法は、ICH ガイドラインに従って検証されました。

2-ジエチルアミノエチル-4-アミノ-3-ブトキシ安息香酸のパラアミノ安息香酸エステルであるベノキシネート塩酸塩（BEN-HCl）1は、短い眼科処置で0.4%溶液の塩酸塩として使用されます2。 BEN-HCl の純度は 99.80 ± 0.6% でした 3。米国、ヨーロッパ、および日本の薬局方はすべて、類似物質であるテトラカインよりも刺激が少ない局所麻酔薬として結膜に投与すると、正式な医薬品として記載されています3、4、5。その分析プロファイルには、分光光度法 6、7、8、電気化学法 9、クロマトグラフィー (HPLC および GC) 法 7、10、11 などのさまざまな技術が含まれていました。ただし、装置のコストが高く、溶媒の種類が多すぎるため、HPLC と GC はすべての研究室で頻繁に使用されるわけではありません。したがって、分光法のような他の単純で迅速かつ経済的なアプローチが必要となります。

材料科学の分野では、候補となる分析方法、すなわち分光蛍光分析が、多くの高感度測定の共通基盤となっています 12、13、14、15。固有の感度、迅速性、および検出の広い直線範囲により、蛍光分光光度計の利用は日常的な分析およびモニタリングに望ましいものとなっています 16。この原稿では、室温、弱アルカリ性 pH でのフルオレスカミンと BEN-HCl の第一級アミノ基との相互作用に基づいて BEN-HCl を測定する方法を提案しました。この相互作用により強い蛍光化合物が生成されます。アミノ基誘導体化蛍光試薬としてフルオレスカミンを使用する利点が、提案された方法での使用の背後にある理由でした。フルオレスカミンには、簡単さ、速度、加熱の必要がないなど、他の蛍光発生化合物に比べていくつかの利点があります。フルオレスカミン試薬はそれ自体は非常に弱い蛍光を発しますが、アミノ基と反応すると非常に蛍光性の高い反応生成物（ピロロンカチオン）を生成します17。この反応は pH に依存し、ピロロンカチオンは不飽和、共役、平面状、構造が硬いため、弱アルカリ性媒体中では非常に発光します。酸性または強アルカリ性の媒体では、別の非平面的で共役度の低い誘導体が生成されます。

現在の分析研究所の主な目標の 1 つは、グリーン分析化学 (GAC) の開発を推進することです。 GAC の 12 の基本ルールは、すべてのグリーンネス評価ツールが依存する原則です18、19、20。 GAC の主な目標は、分析方法に関連する環境リスクの軽減と、その結果の高品質を再確立することの間のバランスを見つけることです。ただし、有害な化学物質や溶剤、エネルギーを浪費する機械、大量の有毒廃棄物の導入、または環境や人間の健康に対する予想されるリスクなどの環境危険性は、徹底的に評価する必要があります。この評価のために、多くの評価評価ツールが設計されています23。分析エコスケール評価 (ESA) とグリーン分析手順指数 (GAPI)24,25 を利用して、提案された方法のグリーンネスプロファイルを評価し、優れたグリーン性を備えていることが証明されました。

さらに、Quality-by-Design (QbD) モデルは、開発されたメソッドの設計、変更、検証に多くの利点がある統計ベースの戦略を利用しています 26,27。単変量手順と比較して、最適化に必要な労力、時間、リソースは大幅に少なくなります。さらに、重要なメソッド変数を正確に決定し、メソッドの理想的なパフォーマンスと信頼性を示すプロットを提供することにより、実験計画の開発により、開発されたメソッドのパフォーマンスをより良く改善し、理解することが可能になります28。 QbD の魅力は、単変量手法の動作とは異なり、最も重要な要素を特定し、分類し、それらの関係を分析する能力から生まれます。この調査では 2 レベルの完全要因計画 (24 FFD) が選択されました。これは、これが最も単純なスクリーニング計画の 1 つであり、限られた数の実験で多くの変数のスクリーニングを可能にするためです 29,30。

したがって、提案された研究は、純粋な形、点眼薬、人工房水を含むさまざまなマトリックス中の BEN-HCl を迅速、安全、経済的に定量するために使用できる、QbD を利用したグリーンな分析アプローチを作成することを目的としています。。良好な選択性、感度、および単純さは、本発明の方法の重要な特徴である。現在の研究の新規性は、QbD アプローチを採用することにより、BEN-HCl のアミノ基誘導体化蛍光試薬としてフルオレスカミンを使用する最初の方法論であるという点で取り上げられています。この研究は、大量の有機溶媒や HPLC や LC-MS のような複雑な技術を必要とせずに、研究対象の薬剤を推定するための環境に優しく、経済的でシンプルな分析ソリューションを表します。

蛍光スペクトルは、励起用の150Wキセノンランプ源および1cm石英セルを付属したFS5分光蛍光計(エディンバラ、英国)によって得た。この機器には Fluoracle® ソフトウェアが付属しています。速度は 1000 nm/min、スリット幅は 2.0 nm に選択されました。スイス製の分析用デジタル天秤を使用した。溶液のｐＨを測定するために、ＡｄｗａのｐＨメーター（モデル；ＡＤ１０３０）を使用した。実験計画の統計的評価は、Minitab® 16 統計ソフトウェア (ペンシルベニア州立大学) によって実行されました。

すべての試薬と化学薬品は分析グレードのものでした。エジプト、ギザの国立薬物管理研究機関 (NODCAR) は、純度 99.80 ± 0.6% のベノキシネート塩酸塩 (BEN-HCl) を提供しました。 0.4%、w/v (11.6 mM) 滅菌点眼液 (BENOX®、B. no. MF07) を地元の薬局から購入しました。

10.0 mgのBEN-HClを100.0 mLの超純蒸留水に溶解することにより、BEN-HClの標準溶液（0.1 mg/mL）を作成しました。キャリブレーショングラフと品質管理 (QC) サンプルは、このソリューションを使用して準備されました。品質管理サンプルは 0.1、0.4、および 1.0 μg/mL の 3 つの濃度レベルで生成され、検量線は 0.1 ～ 1.0 μg/mL の範囲の 6 つの濃度レベルを使用して取得されました。この溶液は、冷暗所に保管した場合、少なくとも 1 週間は安定であることが判明しました。

フルオレスカミン色素は、Sigma-Aldrich Company (ドイツ) から購入しました。それは、アセトン中で０．０４％（ｗ／ｖ）の濃度で新しく作られた。ホウ酸と水酸化ナトリウムを使用してホウ酸緩衝液（0.1 M、pH 7.5 ～ 9）を調製しました。人間の房水の化学組成を模倣するために、Macri らによって報告された方法に従って人工房水が作成されました 31。

校正済みの 10 mL メスフラスコのセットに、濃度範囲 0.10 ～ 1.0 μg/mL の正確な量の標準 BEN-HCl を充填しました。１．５ｍＬのホウ酸緩衝液（０．１Ｍ、ｐＨ８．２）および１．０ｍＬのフルオレスカミン溶液（０．０４％、アセトン中ｗ／ｖ）を加え、完全に混合した。蒸留水を加えて標線量まで加え、５分間放置した。得られた反応生成物の蛍光を393nmで励起後、波長483nmで測定した。同じ方法をブランク実験でも使用しましたが、BEN-HCl は存在しませんでした。

超純蒸留水を使用して、20 mg の BEN-HCl を含む特定の量の BENOX® 点眼液を正確に希釈しました。溶液を同じ溶媒でさらに希釈して、100.0μg/mLの濃度を得た。線形範囲内のさまざまなサンプルは、「一般的に推奨される手順」の手順に従って測定されました。点眼液の公称含有量は、対応する回帰式を使用して計算されました。

人工房水のアリコートを 10 mL メスフラスコのセットに入れました (各 1.0 mL)。 BEN-HCl 使用溶液の定量的アリコートを使用濃度範囲内で添加し、その後 2 分間ボルテックス混合しました。フラスコに蒸留水を加えて定容にしました。次に、得られた溶液を濾過し、「一般的に推奨される手順」で述べたように分析しました。

メソッドの選択性、キャリブレーショングラフの直線性、定量限界 (LOQ)、検出限界 (LOD)、精度、精度、回収率がすべて研究されました。選択性を確認するために、直線範囲 (0.15、0.30、0.40、0.60、および 0.08 μg/mL) 内で人工房水にスパイクされた 5 つの異なる標準 BEN-HCl サンプルを測定しました。検量線の直線性は、既知の濃度 (6 つの濃度ポイントで 0.10 ～ 1.0 μg/mL の範囲) の標準 BEN-HCl サンプルを作成および分析し、各濃度について 3 回測定することで評価されました。 LOD と LOQ は、次の方程式を使用して計算されました。

ここで、S は検量線の傾き、σ は切片の標準偏差です。

精度と精度は、3 つの検証日のそれぞれに 3 つの濃度レベル (0.20、0.40、および 1.00 μg/mL) のそれぞれで QC サンプルを 3 回測定することによって評価されました。 %RSD を使用して精度を計算し、公称濃度に対する測定濃度のパーセンテージを使用して精度を計算しました。精度が適切かどうかを判断するために使用された基準は、%RSD が 15% を超えず、精度が実際の値の 15% 以内であることでした 32,33。医薬品および/または人工房水からの BEN-HCl の回収率 (抽出効率) を決定するために、抽出された BEN-HCl の蛍光強度 (FI) を、100% 回収率を表す純粋な標準の蛍光強度 (FI) と比較しました。

実験計画の実現可能性を評価するには、初期実験を実行する必要がありました。 BEN-HCl の蛍光強度に対するさまざまな実験条件の影響を調べた結果、最も重要な独立因子は緩衝液の pH、緩衝液の体積、フルオレスカミンの体積、および反応時間であることが判明しました。各因子の範囲を特定するために、2 つのトライアルセット (1 つは最大レベル、もう 1 つは低い設定) が実行されました。緩衝液の pH の選択範囲は (7.4 ～ 8.2)、緩衝液とフルオレスカミンの量の範囲はそれぞれ (0.5 ～ 1.5 mL) と (0.5 ～ 1.0 mL)、反応時間の選択範囲は (0 ～ 5 分) でした。）。最適な応答値を提供する最適な設定を調査するために、16 の計画された実験を使用して FFD を実行しました (表 1)。

各実験から得られた応答 (RFI) が測定され、Minitab プログラムに入力されました。応答オプティマイザーを利用して、複合 (D) と個別 (d) の両方の望ましさの値が最大化されました。次に、最適化プロットを使用して、最良の応答を生み出す最も有利な実験パラメータを確認しました (図 1)。その後、採用された理想的な条件下で研究が実施されました。

24 個の FFD 最適化プロット。

スキーム 1 に示す提案された反応機構は、BEN-HCl がその一級脂肪族アミノ基を介して試薬とどのように反応し、試薬の蛍光を刺激するかを示しています 35、36、37、38、39。得られた蛍光体は、393 nmで励起した後、483 nmの特定の波長で発光します（図2）。

pH 8.2 における BEN-HCl とフルオレスカミンの反応機構が報告されています。

BEN-HCl (0.4 μg/mL)、0.1 M ホウ酸緩衝液 (pH = 8.2、1.5 mL)、およびフルオレスカミン (0.04%、w/v (14.0 μM)、1.0 mL) の反応生成物の励起/発光スペクトル。

分析用 QbD の利点に従って、蛍光反応生成物の分光蛍光特性と、その安定性と強度に影響を与える実験変数が調査され、最適化されました。緩衝液の量と緩衝液の pH が最も重要な独立変数であることが示されましたが、フルオレスカミンの量 (0.04%、w/v) と反応時間はそれほど重要ではないことがわかりました。前述のすべての実験では、BEN-HCl を 0.4 μg/mL の濃度で使用しました。

予備実験から、pH効果は7.0〜9.2の範囲で調べられ（図S1）、得られた生成物の強度は弱アルカリ性媒体でのみ発現し、酸性媒体では完全に消失することがわかりました。非平面微分の形成17．結果として、研究の pH は 7.4 ～ 8.2 の範囲に制限され、これにより最適なホウ酸緩衝液を選択できるようになりました 35、36、37、38。最適な pH は pH 8.2 であることがわかりました (図 1 および 3)。さらに、非平面的であり、3D構造を持つカチオン性ピロロンよりも共役度が低いヒドロキシル化ピロロンの形成により、pHが上昇するにつれて蛍光強度が低下することが観察されました（図S1）。蛍光強度に対するホウ酸緩衝液量の影響は、最初の試験では 0.5 ～ 2.0 mL の範囲で調査されました (図 S1)。得られた結果から、設計のために選択されたドメインは 0.5 ～ 1.5 であり、最大応答は 1.5 mL のバッファーで得られました (図 1 および 3)。その結果、実験全体を通じて、pH 値 8.2 の調製済みホウ酸緩衝液 1.5 mL が使用されました。さらに、最初の試験では、0.3〜1.5の範囲の量のフルオレスカミンがテストされました（図S1）。 0.5 ～ 1.0 mL のフルオレスカミン (0.04%、w/v、14.0 μM) が設計のドメインとして選択され、最大の生成物蛍光は 1.0 mL で得られました (図 1 および 3)。次に、最終反応生成物の安定性と形成を、最初の試行で 0 分から 15 分まで定期的にテストしました (図 S1)。設計には 0 ～ 5 の範囲のドメインが選択され、最適な蛍光強度が約 5 分で達成されました (図 1 および 3)。これは、反応生成物がいかに迅速に生成されるかを示し、メソッドのスループット分析を向上させることができます。製品の蛍光は室温で少なくとも 15 分間安定であることもわかりました (図 S1)。これは、開発された方法に別の利点を追加します。これらの入力範囲は、研究対象の薬物の蛍光強度に対する最も重要な効果が選択された範囲で見つかったため、選択されました。

RFI 対重要な独立因子のすべてのペアの表面プロット。

最初の実験によれば、4 つの独立変数は緩衝液の pH、緩衝液の体積、反応時間、およびフルオレスカミンの体積であり、依存性応答 (RFI) に最も大きな影響を与えました。実験セクションの「要因計画」で説明されているように各変数の範囲を特定した後、表 1 にリストされている 16 の準備された実験を使用して 24 FFD が実行されました。その後、16 の実験からの応答が Minitab ソフトウェアに入力されました。応答オプティマイザーを利用して、望ましい応答を最大化しました (表 2)。本研究の高い複合満足度 (D) スコアは、条件が許容できることを示しています。最適化プロット (図 1) と望ましさの分析を使用して最適条件を回復しました。その結果、pH 8.2、緩衝液量 1.5 mL、フルオレスカミン量 1 mL、反応時間 5 であることがわかりました。分。

QbD を採用することの最も重要な利点の 1 つは、依存応答に最も重要な影響を与える変数を認識して評価できることです。さらに、従来の最適化手法では達成できなかった、これらの変数の相互作用の分析が可能になります30。これを行うには、パレート図、主効果プロット、正規プロット、完全交互作用プロットなどのいくつかの Minitab プロットを使用できます (図 4)。さらに、表 3 に示されている計算された独立変数係数 (コード化された単位のデータ) を利用することで、RFI 応答の定量的な分析が可能になりました。主効果プロット、パレート図、正規プロット (図 4) から、反応時間と緩衝液の pH が RFI に最も大きな影響を与えると結論付けられました。推定された効果値によれば、これらの特性は RFI に好ましい影響を与えます。相互作用プロットによれば、緩衝液の pH、緩衝液量、反応時間の間の相互作用も RFI に最もプラスの影響を与えます。対照的に、緩衝液量は RFI に対する影響が最も小さく、推定された効果の中で最小値を示しました (表 3)。効果の重要性は、効果のばらつきを実験誤差の推定値と比較する分散分析 (ANOVA) によっても研究されました。得られた結果を表 4 にまとめます。

(A) アルファ = 0.05 における RFI への影響の 24 FFD パレート図、(B) データ平均タイプ別の RFI の 24 FFD 主効果プロット、(C) アルファ = 0.05 における RFI への影響の 24 FFD 正規プロット、(D) データ平均タイプ別の RFI の 24 個の FFD 完全相互作用プロット。

モル比濃度 (1.60 μM) による Job の連続変動法 41,42 を適用して、検査した BEN-HCl とフルオレスカミン試薬の比率を計算しました。観察したように、それらの間の反応はモル比 1:1 であることがわかりました (図 5)。この比率は、BEN-HCl が 1 つのアミノ基を有するという事実と一致しています。

ホウ酸緩衝液、0.1 M (1.5 mL、pH 8.2) を使用した、BEN-HCl とフルオレスカミン (両方とも 1.60 μM) の間の反応の連続変化のジョブ法。

提案された方法の妥当性は、国際調和評議会 (ICH) Q2/R1 ガイドライン 43 に従って調査されました。ここで、直線性の範囲、LOD、LOQ、精度、精度、堅牢性、および選択性が確立されています。適切な BEN-HCl 濃度を使用して蛍光強度を測定した後、開発されたメソッドは、理想的な反応条件下で濃度範囲 (0.10 ～ 1.0 μg/mL) で許容可能な直線性 (r2 = 0.9998) を示しました。直線性は回帰式 y = 123.55x + 288.22 に従いました。 LOD と LOQ は、実験セクションで説明したように計算すると、それぞれ 0.015 μg/mL と 0.045 μg/mL であることがわかりました。

メソッドの精度を評価するために、BEN-HCl の 3 レベルの QC 濃度 (0.20、0.40、および 1.00 μg/mL) が使用されました。各濃度で、測定を 3 回繰り返しました。表 5 によれば、検出された % 回収率の範囲は 97.0 ～ 100.6、SD の範囲は 0.58 ～ 1.52 であり、この方法の精度が高いことを示しています。

提案手法では、日内精度と日内精度という 2 つのレベルの精度がチェックされました。 BEN-HCl 濃度 0.35、0.45、および 0.55 μg/mL の 3 つの測定は同日に測定され、他の 3 つの試験は次の 2 日に実施されました。表 6 によれば、結果の % RSD 値は 2% 未満であることがわかり、提案されたアプローチの精度が高いことが実証されました。

このメソッドの堅牢性は、pH (8.2 ± 0.2)、緩衝液量 (1.5 ± 0.5 mL)、およびフルオレスカミン量 (1.0 ± 0.3 mL) などの実験パラメータのわずかな変動が RFI に及ぼす影響を調査することによって評価されました。計算された濃度の得られた値は、実際には％相対誤差（％ＲＥ）として表された。 %RE は、実験値を正しい値または予想される値と比較し、答えをパーセンテージの絶対値として表します。 %RE が 0% の場合は、実験値が期待値と同じであったことを意味し、その値が低いこともメソッドの精度を示しています。表 7 に示すように、意図したわずかな変動は RFI に影響を与えず、提案された方法の堅牢性が実証されました。

次に、マトリックス効果が研究されました。そこでは、干渉の存在をテストするために、さまざまなスパイクされた房水サンプルが準備されました。提案された方法は、賦形剤や添加剤による干渉なしに高い回収率 (98.74 ～ 101.37%) と低い SD 値 (≤ 1.11) を示し、マトリックス効果が無視できることを示しました (表 8)。

提案された方法は、点眼薬 (Benox® 点眼薬) 中の BEN-HCl の測定に適用することに成功しました。表 9 に示すように、さまざまな濃度の平均回収率は十分であり、サンプルマトリックス干渉の兆候はありませんでした。提案および報告された方法 7 の結果の統計的評価が実行されました。表 9 に示すように、95% の信頼レベルで Student の t 検定および F 検定を使用した場合、両方の変数の推定値が理論値を超えることはありません。

固定時間法の設計は、人工のスパイクされた房水を用いて BEN-HCl を検査するために提案された方法に適用されました。確立された検量線 (0.1 ～ 1.0 μg/mL) の範囲内の特定の BEN-HCl 濃度 (0.15、0.3、0.4、0.6、0.8 μg/mL) を、調製された人工房水に添加し、提案された方法を適用した後、、各濃度の RFI を測定しました 31。表 8 に示すように、(98.74 ～ 101.37%) の範囲の高い回収率と低い SD 値 (≤ 1.11) が得られ、相関係数は 0.9998 でした。

分析エコスケール評価 (ESA) とグリーン分析手順インデックス (GAPI) は、大部分の分析手法に適用できるため、比較的最もよく使用される尺度です。現在の調査では、これらの評価ツールを使用して、開発された手法の環境プロファイルを評価しました。

分析 ESA は、主にメソッドのグリーンパラメータの定量化を目的として作成され、最も有用な評価ツールです 44。それは、使用される化学物質と溶剤の種類、職場の潜在的な危険性、プロセス中に使用されるエネルギー量、および生成される廃棄物の量に基づいて、開発された方法に割り当てられたペナルティポイントを測定するために使用される計算によって異なります。 (ESA の結果としての) 数値は、評価スコア 100 からメソッドに割り当てられた合計ペナルティポイントを引くことによって生成されます。

テストされた分析方法は、100 に近づくほどより効果的になります。提案された方法の結果は、BEN-HCl を含む点眼薬に適用された場合、89 という高いスコアを示しました。その結果、開発された方法はよりシンプルで環境に優しいことが証明されました。表 10 は、提案された方法によって生成された各分析 ESA スコアの詳細な説明を示しています。

GAPI の基礎は、5 つの五芒星からなる 3 色の位相ピクトグラムです。分析プロセスの各ステップを表すために使用される五芒星は、そのステップが環境に与える影響を象徴しています。環境負荷の度合いを緑、黄、赤の3色で表します。 GAPI は、分析プロセスのさまざまなステップがいかに環境に優しいかについての簡単な概要と徹底的な分析の両方を提供するため、ESA の利点を組み合わせる利点を実証します23。 GAPI は、半定量的なツールとして各ステップのグリーン特性を決定するためにも使用されました。提案された方法では廃棄物がほとんど発生せず、少量の非毒性の化学物質が必要です。さらに、この方法は直接的であり、適格性評価と定量化を目的としています。表 10 の絵文字は、満足のいく結果が優れたグリーン手法を示していることを示しています。

市販の点眼薬と人工房水の両方に含まれる BEN-HCl を測定するために、効率的、迅速、高感度、環境に優しい分光蛍光分析法が開発されました。提案された技術は、室温でのフルオレスカミンと BEN-HCl の第一級アミノ基との相互作用に基づいています。 393 nm で励起した後、483 nm で反応生成物の RFI を測定しました。分析品質による設計手法を採用することで、重要な実験パラメータを注意深く検討し、最適化することが可能になりました。開発されたメソッドのグリーンネスプロファイルは、分析 ESA および GAPI ツールを使用して検証されました。提案された方法は、以前に報告されたアプローチの欠点を解消し、品質管理研究所で引用された薬物の推定に適用できる可能性があります。

現在の研究中に生成および/または分析されたデータセットは、合理的な要求に応じて責任著者から入手できます。

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著者らは、サウジアラビア、リヤドのキング・サウド大学の研究者支援プロジェクト番号 (RSP2023R516) に感謝します。著者らは、この研究を支援してくれたシャクラ大学科学研究部長に感謝したいと思います。

シャクラ大学薬学部薬科学部、シャクラ、11961、サウジアラビア

モハメド・A・エルハムド

サウスバレー大学薬学部医薬品分析化学部門、ケナ、83523、エジプト

モハメド・A・エルハムド

マンスーラ大学薬学部医薬品分析化学学科、マンスーラ、35516、エジプト

マフムード・エル・マグラベイ

カフレルシェイク大学薬学部製薬分析化学部門、カフレルシェイク、33511、エジプト

ガラル・マグディ

キングサウド大学薬学部薬学部、リヤド、11451、サウジアラビア

ワエル・A・マハディ & スルタン・アルシェリ

メヌフィア大学薬学部薬剤化学科、シェビン・エルコム、32511、エジプト

アムル KA バス

メヌフィア大学薬学部医薬品分析化学学科、Shebin Elkom、32511、エジプト

ハニー・A・バタクシー

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MAE: 概念化、方法論、データキュレーション、検証、原案作成。 ME: 概念化、データキュレーション、検証、執筆レビューと編集。 GM: 方法論、データキュレーション、検証、執筆レビューおよび編集。 WAM & SA: リソース、執筆、レビュー、編集。 AKAB: 視覚化、執筆レビュー、編集。 HAB: 概念化、方法論、形式分析、視覚化、検証、原案の作成。著者全員が原稿の出版を承認しました。

Mohamed A. El Hamd、Mahmoud El-Maghrabey、Galal Magdy、または Hany A. Batakoushy への通信。

著者らは競合する利害関係を宣言していません。

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転載と許可

El Hamd, MA、El-Maghrabey, M.、Magdy, G. 他点眼液および人工房水中のベノキシネート塩酸塩の環境に優しい蛍光発生測定を採用するための品質バイデザインの適用。 Sci Rep 13、8559 (2023)。 https://doi.org/10.1038/s41598-023-35347-6

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受信日: 2023 年 4 月 3 日

受理日: 2023 年 5 月 16 日

公開日: 2023 年 5 月 26 日

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